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細(xì)胞培養(yǎng)恒溫振蕩器等常用器材

更新時間:2018-01-29瀏覽:1412次

   細(xì)胞培養(yǎng)恒溫振蕩器等常用器材

  細(xì)胞培養(yǎng)過程中有哪些器材或者媒介我們可以利用呢?一般分為:水、PBS、胰蛋白酶溶液、恒溫振蕩器、CO2培養(yǎng)箱,這幾類可以幫到我們的實驗。
  以下簡單介紹以下各種媒介的作用:
  1、水:細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水。
  2、PBS :主要用于免疫組化染色時組織或細(xì)胞的漂洗。
  3、胰蛋白酶溶液:胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關(guān),在pH為8.0、溫度為37℃時,胰酶溶液的作用能力zui強。使用胰酶時,應(yīng)把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性。終止消化時,可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細(xì)胞的作用。稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水中。攪拌混勻,置于4℃內(nèi)過夜。4、恒溫振蕩器的應(yīng)用:體外培養(yǎng)的細(xì)胞和體內(nèi)細(xì)胞一樣,需要在恒定的溫度下生存,大多數(shù)情況下,恒溫振蕩器zui適溫度是37℃,溫差變化一般不應(yīng)超過±0.5℃,細(xì)胞在溫度升高2℃時,持續(xù)數(shù)小時即不能耐受,40℃以上將很快死亡。因此需要有能控制溫度的恒溫振蕩器,如具有較高靈敏度的恒溫振蕩器及CO2培養(yǎng)箱。
  5、CO2培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的*儀器,它為細(xì)胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、CO2濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。